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PCR实验室为什么要求严格分区

2022-05-10 09:47:17

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　　PCR实验室常见的三个区域是指：

　　1.试剂配制区：PCR反应系统配制区。

　　2.标本处理区：包括扩增模板的制备，即我们经常提取DNA的地方;

　　3.PCR扩增及产品分析区：PCR扩增区，也是扩增产品进行凝胶电泳分析的区域。

　　此外，如果PCR扩增区与产品分析区再次分离，则为四区隔离。

　　四区隔离的主要目的是防止每个PCR区域之间的气溶胶流动——最好的方法是将每个区域分开一栋建筑，这绝对是最好的隔离措施，但操作绝对不现实，因此有一种方法可以为不同区域设置正负压：

　　试剂配制区(一区)：最干净的区域，保持微正压，使外界空气无法进入隔离污染源。阴性模板应加入PCR管并盖，严禁在该区域打开。存放带DNA模板的离心管;

　　DNA模板添加区(二区)：保持微负压，保证内部空气不泄漏，避免阳性模板气溶胶污染外部环境。

　　扩增及PCR产品分析区(三区)：保持微负压，防止内部空气泄漏，避免扩增产品气溶胶污染外部环境。

　　操作时遵循一区→二区→三区单向，不可逆转。

　　对于用于科研的PCR实验室，如果不能满足三区严格隔离的要求，至少应隔离两区：正压区和负压区。正压区实施一区功能，负压区实施二区、三区功能。

　　最忌讳、最可怕的是在正压区实施三区功能。关键是PCR实验室不同区域之间的空气是否相互循环。

　　如果有问题，我们的实验室没有正负压区分，或者全负压，全正压怎么办?然后我们的建议是：不要害怕麻烦，找一个远离三个区域的实验室(通常打开PCR扩展产品的盖子区域，如电泳区)作为PCRI区域，可以节省更多的后续麻烦。

　　由于PCR三区隔离的目的是阻断气溶胶的交流，请注意以下细节，思考气溶胶来自哪里：

　　1.各区域应配备专用移液器，不得交叉混用。

　　2.各区域应配备专用移液器吸头，不得交叉混用。

　　3.如果条件允许，在PCRII区工作后，需要更换实验服、一次性鞋套、帽子、手套。

　　4.在PCRI区域。PCRI区备滤芯吸头。

　　以上就是关于PCR实验室要求严格分区的相关介绍，希望能帮助大家。

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