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细胞培养箱被污染怎么消毒

2021-12-22 13:43:19

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  凡是混入细胞培养箱(细胞培养环境)中,对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。细胞持续在污染环境中生长时,轻者细胞生长缓慢,细胞分化变形,较重的细胞增殖停止,从瓶壁脱落,甚至死亡。不同的污染物对细胞的影响也有差别,有的影响是长期,缓慢和潜在的,而有的则能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质杀害细胞。那么,细胞培养箱被污染怎么消毒?下面就来聊聊细胞培养箱消毒方法。

一、细胞培养箱的污染源

  根据细胞培养箱污染源的不同,主要可以分成:生物性污染、化学性污染、物理性污染以及气溶胶污染。

  1、生物性污染:这是最常见也是危害最大的污染。比如细菌、病毒、真菌,支原体等,这些污染源有可能是人为带入,或是细胞在放入培养箱前已经受污染,又或是箱体本身没有消毒干净。体外培养的细胞自身没有抵抗污染的能力,而培养基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而细胞微生物污染一旦发生往往是无法挽救的。

  2、化学性污染:培养箱中许多化学物质都能够引起细胞污染。比如细胞培养容器清洗过程中残留的洗涤剂、加湿器中未纯化的水、人为带入的液体或气体都可能成为化学性污染的来源。不同化学物质对细胞污染不一样,有的可能促进或抑制细胞生长,有的甚至会杀死细胞。

  3、物理性污染:培养环境中的物理因素,如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染,其主要是在代谢水平或分子水平上,影响细胞正常的生理过程。

  4、气溶胶污染:气溶胶是液体或固体微粒均匀地悬浮在气体介质中的分散体系,当微粒是微生物时,就是微生物气溶胶,如果这种微生物是病原性的,就是病原微生物气溶胶。细菌、病毒等病原体通过气溶胶可在人与人、人与环境之间传播。微生物气溶胶可分为两大类:一类是飞沫核气溶胶,另一类是粉尘气溶胶。医学实验室内许多操作都可以产生气溶胶,并且大多可能是病原微生物形成的感染性气溶胶,由于其气溶胶分子小,漂浮在空气中、粘附于人身上,易在空气中扩散而污染实验室的空气。

二、细胞培养箱清洁消毒

  1、培养箱消毒:先用纯水擦洗,接着用95的酒精擦洗,再照紫外就可以了。

  2、方法比较简单,先用75%酒精擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。

  3、通常用70%的乙醇擦洗,然后再用0、1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1比例熏一遍、注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的、在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞、

  4、通常处理方法是先用75%的酒精擦拭内壁,接着用甲醛高锰酸钾熏蒸一个晚上,再通风一整天(同时打开紫外线照射)。

  5、熏蒸后吹一天是不够的,起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的。

  6、有的培养箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功能、常规应该每周用酒精擦洗内部一次、具体的操作请参考培养箱的手册,或着咨询培养箱技术支持、使用消毒剂应小心,培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件,请慎用、另外,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆、如果在培养箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦、总之,先看培养箱手册,再联系技术支持,方可万无一失啊、

  7、常规什么也不放!硫酸铜的作用是抑制细菌生长(但多数用在处理污染的孔板)、因为现在的孵箱都有抑菌功能。

  8、在补充水时把水加热一下,达到培养箱的温度。

  9、实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水、再加少量新洁尔灭,浓度没关系、细胞养的都可以。

  10、把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好。

三、细菌培养箱水盘出现霉菌怎么办?

  细菌培养箱中的水盘里出现霉菌,有一种方法可以在不移除细胞的情况下能够消灭培养箱中的霉菌,已经长出霉菌,建议把所有细胞移出到其他培养箱。将这个培养箱全面消毒,喷酒精,紫外灭菌至少1个小时。因为我们组细胞染过菌,一旦培养箱不洁净,会导致所有培养细胞都要染菌的,爆发以后很可怕。培养箱出现霉菌很可能是水槽的水不够洁净,一定要用超净水超纯水来填充水槽,避免霉菌生长。要定期更换水槽中的纯水。一个月左右换一次。一个季度到半年要培养箱彻底灭菌一次。

  以上就是关于细胞培养箱被污染怎么消毒的相关介绍,供大家参考。

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